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對(duì)于ELISA試劑盒選擇的一些自我理解

發(fā)布時(shí)間:2012-08-10瀏覽:3310次

*,談一下如何靈活應(yīng)用ELISA這個(gè)檢測(cè)方法以及如何去挑選ELISA試劑盒。ELISA這個(gè)方法的原理,ELISA試劑盒大家都很清楚,網(wǎng)上的資料一大堆??烧嬲闷饋?lái)的時(shí)候,有時(shí)候就有點(diǎn)犯糊涂,我談一下自己的理解。  ELISA試劑盒價(jià)格
1、有些客戶會(huì)用OVA(卵清蛋白)做一些哮喘,過(guò)敏性腸炎的模型,后來(lái)會(huì)檢測(cè)粘膜特異性的sIgA以及血清里面IgG,豬ELISA試劑盒IgE等指標(biāo)。當(dāng)客戶向我咨詢購(gòu)買這幾個(gè)指標(biāo)的盒子的時(shí)候,我很肯定地說(shuō)這些指標(biāo)的檢測(cè)要你自己特制,不會(huì)有商品化的盒子出售的。當(dāng)baidu,google一下,頁(yè)面出來(lái)大量的商品化的盒子,千篇一律的說(shuō)明書時(shí)候,我真的是蒙了,我懷疑自己跟不上時(shí)代了。我這里不去評(píng)論這些盒子的真假,我仍然建議做這些檢測(cè)指標(biāo)的戰(zhàn)友,選擇sigma公司V級(jí)別的OVA,然后用這個(gè)來(lái)造模,自己包板摸條件,用OD值來(lái)比較抗體含量的變化。
2、對(duì)于一些小分子的檢測(cè),比如前列腺素、糖皮質(zhì)激素的檢測(cè),我的理解是要用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA去檢測(cè),也要購(gòu)買采用這個(gè)方法的盒子。一般細(xì)胞因子的檢測(cè),都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測(cè),因?yàn)橐蜃臃肿恿勘容^大,一般10幾個(gè)KD左右,很容易找到兩個(gè)或者多個(gè)抗原表位。而小分子很難找到兩個(gè)不同的表位,也就決定了包被抗體和檢測(cè)抗體無(wú)法同時(shí)結(jié)合小分子并固相化。解決方案就是酶標(biāo)板上包被二抗,每個(gè)孔加入一定量的酶標(biāo)的小分子,然后加樣品,再加不帶標(biāo)記的檢測(cè)抗體,顯色底物。樣品的目的小分子的含量越高,吸光度越低。
3、對(duì)于胰島素的檢測(cè),我還是推薦millpore 旗下LInco公司的檢測(cè)試劑盒,不管是放免還是ELISA,據(jù)說(shuō)權(quán)在他們手中。
4、NO的檢測(cè),一般都是采用經(jīng)典的Greiss法,現(xiàn)在市場(chǎng)上竟然有NO ELISA試劑盒,真是徹夜未眠也搞不明白。還有做氧化應(yīng)激指標(biāo)MDA的檢測(cè),我還是推薦大家用碧云天或者進(jìn)口的檢測(cè)試劑盒,而不是ELISA試劑盒。
5、我主要的客戶是醫(yī)學(xué)院校,做實(shí)驗(yàn)面向的種屬主要是人,大鼠和小鼠,現(xiàn)在市面上雞、牛、馬、羊、兔各種指標(biāo)的盒子都有售,真不知道這些抗體是怎么來(lái)的,。據(jù)我所了解,這些炎癥指標(biāo)還是有很大種屬特異性的。
6、ELISA檢測(cè)方法簡(jiǎn)單,靈敏度高,我個(gè)人覺(jué)得ELISA檢測(cè)血清或者培養(yǎng)上清的細(xì)胞因子、胰島素、激素等分泌型的小分子蛋白的定量檢測(cè);病原體抗原的定性與定量;評(píng)估自己制備的血清抗體的效價(jià)等。好多客戶有個(gè)誤區(qū),拿來(lái)一個(gè)指標(biāo)就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去檢測(cè),我還是建議多動(dòng)腦,該檢測(cè)活性的檢測(cè)活性,該做western的做western。
第二 談一下上海吉泰的ELISA檢測(cè)試劑盒,廠家是上海依克賽,應(yīng)用這個(gè)公司的產(chǎn)品,很多客戶也發(fā)表了SCI文章,如果我沒(méi)有記錯(cuò)的話,mouse TGF-beta1 這個(gè)盒子發(fā)表在nature immunology上面,25分多的雜志。這個(gè)廠家產(chǎn)的盒子,是我公司zui主推的盒子,給我的感覺(jué)是靈敏度不夠高,個(gè)位數(shù)pg級(jí)達(dá)不到,血清細(xì)胞因子的檢出率比較低,在估計(jì)范圍內(nèi)??赡茈S著國(guó)內(nèi)研發(fā)技術(shù)的不斷改進(jìn),我想應(yīng)該會(huì)慢慢解決這個(gè)問(wèn)題的。

RnD和Bender等一些的ELISA試劑盒還是很值得信賴的,也得到了市場(chǎng)的認(rèn)可,特別是RnD的盒子,我們賣的很好,就是價(jià)格好貴,經(jīng)費(fèi)不是很充裕的實(shí)驗(yàn)室難消費(fèi)的起。國(guó)內(nèi)的廠家,以前我讀書的時(shí)候,晶美做的很好,也受到了客戶的好評(píng),后來(lái)聽說(shuō),因?yàn)橘Y金鏈的問(wèn)題,解散了,真是可惜?,F(xiàn)在我們市場(chǎng)推薦給客戶的都是上海吉泰和深圳達(dá)科為的盒子,質(zhì)量在靈敏度上和RnD的盒子還是有很大差距,但是有一點(diǎn)是可以肯定的,盒子反映的結(jié)果是公正客觀的。禽ELISA試劑盒 白介素ELISA試劑盒 上海ELISA試劑盒還有一個(gè)缺點(diǎn)就是這兩個(gè)廠家可供選擇的盒子種類比較少,主要集中在炎癥細(xì)胞因子上。
 

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