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10099-141 GIBCO澳洲胎牛血清

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10099-141 GIBCO澳洲胎牛血清

貨號(hào):10099-141

規(guī)格:500ml

品牌:澳洲源

 

10099-141 GIBCO澳洲胎牛血清通常作為補(bǔ)充成分添加在基礎(chǔ)培養(yǎng)基內(nèi)使用。它能夠提供各種大分子蛋白,小分子量營養(yǎng),水溶性成分的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,和其它一些細(xì)胞在體外所必需的成分,如激素和附著因子。血清可以結(jié)合或中和一些生長因子中的有毒成分,并提供培養(yǎng)基的緩沖能力。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)血清的添加依賴于基礎(chǔ)培養(yǎng)基的化學(xué)組成,培養(yǎng)細(xì)胞的類型,及所用的培養(yǎng)系統(tǒng)。

我們?cè)谔峁┘?xì)胞培養(yǎng)基、平衡鹽溶液、無血清培養(yǎng)基和試劑的同時(shí),還提供高品質(zhì)的血清。我們對(duì)血清制備進(jìn)行全過程監(jiān)管。從血清收集到zui終產(chǎn)品檢驗(yàn)和內(nèi)部稽核的每一個(gè)步驟,我們都采用設(shè)備和標(biāo)準(zhǔn)操作程序,以確保整個(gè)過程中每個(gè)環(huán)節(jié)的產(chǎn)品質(zhì)量。對(duì)整個(gè)過程的控制可以保證產(chǎn)品的持續(xù)高品質(zhì),降低不同批次的差異。

處理:全部血清:收集的血液均在冷藏條件下處理。血清和血分離后立即將血清合并并冷凍。只有符合我們的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的血清才被接受作進(jìn)一步處理。

熱滅活血清:熱滅活是在56℃水浴中嚴(yán)格控溫30分鐘。透析血清:用10,000截留分子量的透析膜在0.15M的NaCl中進(jìn)行透析,直到葡萄糖水平低于5mg/dl(用鄰甲苯胺測(cè)試法檢驗(yàn))。γ射線照射血清:可按客戶要求對(duì)血清進(jìn)行γ射線照射。通過γ射線照射以滅活各種動(dòng)物血清(包括胎牛血清、新生牛血清、豬血清和馬血清)中的病毒和支原體的方法已經(jīng)得到證實(shí)。研究證實(shí)照射劑量在30-45kGy為宜。血清在此照射后物理化學(xué)特性和細(xì)胞培養(yǎng)表現(xiàn)沒有變化。裝瓶:粗血清須通過一系列的過濾才成為成品。zui后的過濾步驟包括使用0.2um和0.1um的無菌過濾。胎牛血清須通過三次0.1um過濾,其他血清須通過0.2um過濾。zui終產(chǎn)品的質(zhì)量控制:我們采取以下方法對(duì)每一批次的產(chǎn)品選取一定數(shù)量的樣品進(jìn)行質(zhì)量控制分析:

化學(xué)檢測(cè):使用低溫凝固點(diǎn)的方法檢測(cè)滲透壓,以保證符合產(chǎn)品規(guī)范。我們每天使用國家標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)研究所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)我們的滲透壓檢測(cè)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。同樣每天使用國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)pH計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。

使用電泳圖譜鑒定血清的整體性質(zhì)。樣品被轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素基質(zhì)中,并在緩沖體系內(nèi)遷移。條帶經(jīng)染色、清潔、干燥后用密度儀進(jìn)行掃描,以檢測(cè)白蛋白和球蛋白組分的相對(duì)濃度。為證實(shí)是否在適當(dāng)?shù)臈l件下進(jìn)行采血和處理,使用修飾的Fleming方法對(duì)血紅蛋白進(jìn)行分光光度檢測(cè)。

隨著動(dòng)物年齡的增加,血清總蛋白含量也相應(yīng)地提高。使用自動(dòng)化的Biuret方法進(jìn)行總血清蛋白的檢測(cè),以確認(rèn)動(dòng)物年齡并驗(yàn)證符合產(chǎn)品規(guī)范。使用色度計(jì)在不同波長下檢測(cè)樣品和Biuret試劑混合波的吸光度。自動(dòng)計(jì)算結(jié)果后,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,即可得到蛋白值(克/公升)。

穩(wěn)定性檢測(cè)程序:在每一個(gè)標(biāo)記為體外診斷的產(chǎn)品上顯示的效期表明了這個(gè)產(chǎn)品具有多長時(shí)間的效能。我們的穩(wěn)定性程序確定和證明了產(chǎn)品效期。我們定期監(jiān)測(cè)批量產(chǎn)品,確定產(chǎn)品在推薦貯存條件下具有可接受效果的時(shí)間長度。

微生物學(xué)檢測(cè):所有血清使用Barile&Kern的大體積方法檢測(cè)支原體。在推薦方法的檢測(cè)范圍內(nèi)檢測(cè)結(jié)果是準(zhǔn)確的。樣品至少應(yīng)該在肉湯中合并培養(yǎng)3個(gè)星期,同時(shí)要在瓊脂平板上進(jìn)行不少于4次傳代培養(yǎng)。在有氧和厭氧(95%氮,5%CO2)條件下,平板在36±2℃下孵育。在檢測(cè)過程中,每周對(duì)瓊脂平板進(jìn)行一次微生物生長情況檢驗(yàn)。使用Dienes染色法對(duì)懷疑被污染的瓊脂平板進(jìn)行支原體菌落的檢測(cè)。然后,對(duì)平板進(jìn)行再次鏡檢。對(duì)孵育肉湯瓶要定期進(jìn)行濁度和pH值變動(dòng)的檢測(cè)。在推薦方法檢測(cè)范圍內(nèi),所有血清也要使用Hoechst熒光DNA染色法進(jìn)行不可在肉湯中培養(yǎng)的支原體(包括M.hyorhinis屬)檢測(cè)。

病毒檢測(cè):已知無外來物質(zhì)的細(xì)胞培養(yǎng)基須經(jīng)過在包含15%測(cè)試血清的生長培養(yǎng)基中進(jìn)行為期21天的三次傳代培養(yǎng)。使用對(duì)照培養(yǎng)基和已知對(duì)外來物質(zhì)為陰性的血清平行地維持陰性對(duì)照培養(yǎng)。整個(gè)期間,檢測(cè)所有的培養(yǎng)情況,以便發(fā)現(xiàn)是否存在病毒誘發(fā)的細(xì)胞形態(tài)改變或致細(xì)胞病變效應(yīng)。在14至21天的培養(yǎng)期間,對(duì)含有檢測(cè)血清的平行培養(yǎng)瓶按下面標(biāo)準(zhǔn)病毒檢測(cè)方法進(jìn)行評(píng)估。

將其中一瓶檢測(cè)細(xì)胞用胰蛋白酶消化,然后把細(xì)胞分別加入到總面積為6cm 2 的六室載玻片上。同時(shí)準(zhǔn)備陰性對(duì)照載玻片。在檢測(cè)培養(yǎng)的單室載玻片上加入牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、牛細(xì)小病毒、牛腺病毒、狂犬病毒和呼腸病毒的染色劑,作為單個(gè)的陽性對(duì)照。再經(jīng)過7天培養(yǎng)(總共21天),利用熒光抗體技術(shù)檢測(cè)病毒。

通過對(duì)檢測(cè)培養(yǎng)進(jìn)行蘇木精伊紅染色,觀察致細(xì)胞突變效應(yīng)(CPE)或其他病毒誘導(dǎo)效應(yīng)。檢測(cè)細(xì)胞是否存在CPE效應(yīng)、內(nèi)含物、多核體或其他異常效應(yīng)。

內(nèi)毒素檢測(cè):我們用阿米巴變形細(xì)胞溶解物(LAL)凝膠法來檢測(cè)胎牛血清的內(nèi)毒素含量。

效能檢測(cè):
對(duì)每一批次的胎牛血清,我們都進(jìn)行下述培養(yǎng)效能檢測(cè)。選擇血清zui重要的標(biāo)準(zhǔn)是其支持特殊細(xì)胞的生長能力。因此,除了保證血清通過嚴(yán)格的品質(zhì)控制,我們也同時(shí)在實(shí)驗(yàn)室條件下對(duì)血清的三個(gè)重要的培養(yǎng)效能進(jìn)行檢測(cè):克隆效率、貼壁效果和二倍體成纖維細(xì)胞生長促進(jìn)。

克隆效率分析:克隆效率實(shí)驗(yàn)分析每一批胎牛血清促進(jìn)小鼠骨髓瘤細(xì)胞及其衍生的雜交瘤細(xì)胞的克隆和生長能力。下列產(chǎn)品
經(jīng)驗(yàn)證可用于該實(shí)驗(yàn):
Sp2/0-Ag14(ATCC #CRL 1581)
P3x63-Ag8.653(ATCC #CRL 1580)

每一批胎牛血清都要分別在復(fù)制微量滴定平板上加入兩種血清濃度和兩種細(xì)胞接種量(10%血清和1cell/孔,4%血清和5cells/孔)的情況下進(jìn)行分析??寺》治鼋Y(jié)果除以已確定的參照血清值得以歸一化。在許多日常雜交選擇程序中具有代表性的是高濃度的血清,而低濃度血清在設(shè)計(jì)血清批次細(xì)微差異放大檢測(cè)中有更為嚴(yán)格的測(cè)試。嚴(yán)格的1cell/孔測(cè)試是模擬單一雜交選擇的實(shí)驗(yàn)室條件。為每一批次胎牛血清提供的分析證明報(bào)告中的克隆效率值為兩次測(cè)試條件下的平均值。

克隆分析法:克隆分析法是在復(fù)式96孔板中加入兩種胎牛血清濃度(10%v/v)和(4%v/v)和兩種接種量的情況下進(jìn)行的。每一次化驗(yàn)中,同時(shí)測(cè)量前期已驗(yàn)證合格的一批胎牛血清,并將此測(cè)量值作為內(nèi)部參考標(biāo)準(zhǔn)。
克隆分析按下述方法進(jìn)行:

1.Sp2/0-Ag14(sp2)和P3x63-Ag8.653(653)在含有10%的胎牛血清的RPM1640中通常保持對(duì)數(shù)生長期。在顯微鏡下,利用臺(tái)盼藍(lán)排除法對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。

2.用RPM1640培養(yǎng)基將儲(chǔ)備細(xì)胞懸浮液進(jìn)行連續(xù)稀釋,使其達(dá)到預(yù)期的25cells/ml和5cells/ml接種濃度。準(zhǔn)備含有參照或測(cè)試胎牛血清的RPM1640培養(yǎng)基。將這種密度的細(xì)胞分配到各個(gè)分析生長培養(yǎng)基體積為0.2毫升的孔中,使其分別平均含有5個(gè)和1個(gè)細(xì)胞。

3.將96孔板放入36±2℃,4-6% CO 2 的潮濕培養(yǎng)箱孵育約10至15天。

4.在孵育期間,用肉眼觀察平板并對(duì)用于克隆的孔進(jìn)行計(jì)數(shù)??寺⌒拾聪铝蟹椒ㄓ?jì)算:克隆效率=(陽性孔平均數(shù)/孵育孔總數(shù))×100%

5.每一批次胎牛血清維持指示劑骨髓瘤細(xì)胞克隆效率的定量按照以下方法測(cè)得的相對(duì)克隆效率(RCE)進(jìn)行歸一化:RCE=檢測(cè)血清的克隆效率/對(duì)照血清的克隆效率貼壁效率分析:貼壁效率分析是利用已轉(zhuǎn)型的人類細(xì)胞系來檢測(cè)每一批血清促使持續(xù)貼附細(xì)胞系的生長能力。選擇已被驗(yàn)證可以檢測(cè)貼壁效率的細(xì)胞系A(chǔ)549(人肺腫瘤細(xì)胞,ATCC#CCL,185),是因?yàn)樗梢詤^(qū)分一批血清維持細(xì)胞貼壁和繁殖能力的細(xì)微差異。

每一批次胎牛血清都要在兩種血清濃度和兩種細(xì)胞接種濃度下(10%血清和100cells/孔,4%血清和200cells/孔)測(cè)試三次。在36±2℃,4-6% CO 2 的潮濕培養(yǎng)箱孵育約10至14天,對(duì)被染色的細(xì)胞菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)即可得到其貼壁效率。將結(jié)果除以參考的對(duì)照血清得以歸一化。通過兩種血清濃度的測(cè)試,可以驗(yàn)證該批次血清在減量和標(biāo)準(zhǔn)水平下維持生長的能力。為每一批次胎牛血清提供的分析證明報(bào)告中的貼壁效率值為兩次測(cè)試條件下的平均值。

貼壁分析法:使用貼附分析檢測(cè)上述每一批測(cè)試血清。這種分析法針對(duì)每一個(gè)血清樣品使用一個(gè)6孔板(每室9.6cm 2 ),并可以對(duì)三個(gè)孔的數(shù)據(jù)進(jìn)行平均處理。每一次化驗(yàn)中,同時(shí)測(cè)量前期已驗(yàn)證合格的一批胎牛血清,并將此測(cè)量值作為內(nèi)部參考標(biāo)準(zhǔn)。

貼附分析按下述方法進(jìn)行:

1.A549細(xì)胞系用含有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,在36±2℃,以亞融合密度下進(jìn)行培養(yǎng)。

2.含10%(v/v)和4%(v/v)血清的DMEM由分別在22.5毫升和24毫升DMEM中加入2.5毫升和1毫升胎牛血清配制而成,zui終有效體積為25毫升。將5毫升含血清培養(yǎng)基分別加入6孔板的每一個(gè)孔中。

3.A549培養(yǎng)細(xì)胞先經(jīng)過胰蛋白酶消化,測(cè)定活細(xì)胞數(shù),然后稀釋細(xì)胞懸浮液至2,000cells/ml。

4.將0.1毫升細(xì)胞懸浮液加入200cells/孔室中,0.05毫升懸浮液加入100cells/孔室中。平板混合后放入36±2℃,5%CO 2 的潮濕培養(yǎng)箱孵育約10至14天。

5.孵育后,取出平板,去除生長培養(yǎng)基,用亞甲基蘭-甲醇溶液對(duì)菌落進(jìn)行染色。

6.計(jì)算菌落形成,然后按下述方法計(jì)算貼壁效率:%貼壁效率=每孔菌落平均數(shù)/每孔孵育活細(xì)胞平均數(shù)×100

7.為方便比較,將測(cè)得的貼壁效率數(shù)值除以每批檢測(cè)血清的相對(duì)貼壁效率(RPE)得以歸一化:RCE=檢測(cè)血清的貼壁效率/參照血清的貼壁效率二倍體成纖維細(xì)胞生長:促進(jìn)生長分析用于檢測(cè)每一批胎牛血清維持難培養(yǎng)的人二倍體成纖維細(xì)胞長期生長的能力。

下列細(xì)胞系經(jīng)認(rèn)證可用于該實(shí)驗(yàn):

WI-38(人二倍體肺成纖維細(xì)胞,ATCC#CCL 75)

WI-38細(xì)胞在含5%胎牛血清的低密度(2X10 5 /瓶)復(fù)式25-cm 2瓶中孵育,并進(jìn)行為期三個(gè)連續(xù)7天的傳代培養(yǎng)。在每一個(gè)培養(yǎng)期,細(xì)胞都從初始孵育密度開始傳代培養(yǎng)。壓力分層率、成倍繁殖數(shù)量和減量血清濃度是每批次促進(jìn)難培養(yǎng)二倍體細(xì)胞的生長血清的嚴(yán)格測(cè)試指標(biāo)。通過連續(xù)三代培養(yǎng)以減少前一次生長培養(yǎng)基的殘留影響,從而保證得到檢測(cè)批促進(jìn)生長能力的真實(shí)結(jié)果。為每一批次胎牛血清提供的分析證明報(bào)告為第三次傳代培養(yǎng)每復(fù)式培養(yǎng)瓶細(xì)胞數(shù)的平均值。將檢測(cè)值除以參考對(duì)照值得以歸一化。

二倍體成纖維細(xì)胞生長分析法:培養(yǎng)數(shù)代WI-38人類二倍體肺成纖維細(xì)胞,計(jì)算每一代的細(xì)胞總數(shù)。此項(xiàng)檢測(cè)所挑選出的胎牛血清批號(hào)能維持難以生長細(xì)胞、貼壁性細(xì)胞、正常的細(xì)胞株生長及存活。

1.準(zhǔn)備含5%檢測(cè)血清或已驗(yàn)證合格的參照血清生長培養(yǎng)基,基礎(chǔ)生長培養(yǎng)基為含L-谷氨酰胺的HBME:EBME(1:1)。按要求,在每一次流量變化和分析過程中進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)需配制含5%血清生長的培養(yǎng)基。

2.在低代培養(yǎng)水平時(shí),將2X10 5 WI-38細(xì)胞加入各個(gè)含9.5毫升生長培養(yǎng)基的復(fù)式25-cm 2 培養(yǎng)基中。在不擰緊瓶蓋的情況下,將培養(yǎng)瓶放入4-6%CO 2, 36℃±2℃環(huán)境中,保持24小時(shí)。然后擰緊瓶蓋,將培養(yǎng)瓶放在36℃±2℃下孵育7天,在第2天或第3天全部更換培養(yǎng)基。

3.在第7天,用胰蛋白酶對(duì)每一個(gè)含參照或檢測(cè)血清的復(fù)式瓶中的細(xì)胞進(jìn)行消化得到一定數(shù)量細(xì)胞,然后合并并計(jì)數(shù)。將2x10 5 WI-38細(xì)胞加入含有新鮮生長培養(yǎng)基(已加入了與上一代同一批次的參照或檢測(cè)胎牛血清)的新的復(fù)式25-cm 2 瓶中,進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。按第2步所述,將培養(yǎng)瓶進(jìn)行平衡并孵育。

4.如上所述經(jīng)過三代連續(xù)分析,在每一代結(jié)束時(shí)計(jì)算每一批參照或檢測(cè)血清的每瓶細(xì)胞平均數(shù)。zui后一代培養(yǎng)的各批檢測(cè)血清實(shí)驗(yàn)中的相對(duì)生長率(RGR)作為參照血清實(shí)驗(yàn)中獲得的細(xì)胞生長率分子:

%RGR=檢測(cè)血清實(shí)驗(yàn)中每瓶平均細(xì)胞數(shù)/參照血清實(shí)驗(yàn)中每瓶平均細(xì)胞數(shù)X100S f9細(xì)胞生長促進(jìn)分析。通過昆蟲分析可以保證您購買的胎牛血清批次可以維持S f9細(xì)胞的生長。收到產(chǎn)品后,您需要做的就是混勻血清,在56℃下熱滅活30分鐘。這種分析法也可以用于乳白蛋白水解產(chǎn)品、酵母和其它生長輔料作為原料的生物效能分析。該分析法的準(zhǔn)確性取決于是否用常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)方案進(jìn)行培養(yǎng)。用臺(tái)盼藍(lán)染色排除法測(cè)得的細(xì)胞活性至少不低于80%。

細(xì)胞生長分析法。

1.使用含10%檢測(cè)或參照熱滅活胎牛血清的已驗(yàn)證的Grace昆明培養(yǎng)基配制*檢測(cè)培養(yǎng)基。

2.將儲(chǔ)備Sf9細(xì)胞加入50毫升離心管中,在50Xg下離心5分鐘。然后將每支試管的沉淀物重新用含10%的檢測(cè)或參照熱滅活胎牛血清*培養(yǎng)基配制成懸浮液。

3.反試管顛倒幾次,然后每支試管倒出1毫升樣品。用臺(tái)盼藍(lán)染色排除進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。

4.如果活性≥80%,把試管再顛倒幾次并取出0.25毫升樣品。然后用Coulter計(jì)數(shù)器進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

5.將細(xì)胞加入Erlenmeyer瓶中,使其zui終細(xì)胞濃度為2.75X10 5 cells/ml。孵育后,再一次進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),以保證細(xì)胞密度為2.5X10 5 至3.0X10 5 cells/ml。

6.將培養(yǎng)瓶放到搖床上,在27℃±1℃、80-90rpm條件下孵育96小時(shí)。

7.從每一培養(yǎng)瓶中分別取出0.25毫升樣品,用Coulter計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)。同時(shí)取出一定量的樣品進(jìn)行細(xì)胞活性檢測(cè)。

8.將檢測(cè)細(xì)胞密度與參照細(xì)胞密度相比即可得到相對(duì)細(xì)胞密度(RCN)。

噬菌體檢測(cè):我們利用溶菌斑分析法來檢測(cè)是否存在噬菌體。從每一批血清中取具代表性的樣品加入胰蛋白酶磷酸瓊脂中,并在其加入含有噬菌體敏感的大腸桿菌懸浮液(C-3000或K-12)。然后,混合物會(huì)在胰蛋白酶磷酸瓊脂平板上分層,在36±2℃環(huán)境下孵育約24小時(shí)后,觀察平板上溶菌斑的形態(tài)。

生化特征檢測(cè)。

堿性磷酸酸酶

葡萄糖

重碳酸鹽

高密度脂蛋白(HDL)

膽紅素(總)

乳酸脫氫酶(LDH)

血脲氮(BUN)

低密度脂蛋白(LDL)

BUN/肌氨酸酐比鉀

磷(無機(jī))

血清谷草轉(zhuǎn)氨酶

氯化物

膽固醇

總鐵結(jié)合力

肌氨酸酐

轉(zhuǎn)鐵蛋白

γ-谷氨?;D(zhuǎn)移酶

甘油三酸酯(TG)

尿酸

 

血紅蛋白檢測(cè):所有批次的胎牛血清我們都進(jìn)行了血紅蛋白的檢測(cè),血紅蛋白含量低于《中國生物制品主要原輔材料指控指標(biāo)》(2000年版)公布的指標(biāo)。

效能檢測(cè):其它血清

新生牛血清。檢測(cè)新生牛血清維持超過三代VERO細(xì)胞生長的能力。在每一個(gè)培養(yǎng)期,細(xì)胞都從初始孵育密度開始傳代培養(yǎng)??蓪⑺媒Y(jié)果與使用含有已知特征的參照血清對(duì)照生長培養(yǎng)基獲得的平行結(jié)果進(jìn)行比較。

馬血清。每一批馬血清被檢測(cè)維持在含有檢測(cè)批血清的對(duì)照培養(yǎng)基上Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤)細(xì)胞生長的能力??蓪⑺媒Y(jié)果與使用含有已知特征的參照血清對(duì)照生長培養(yǎng)基獲得的平行結(jié)果進(jìn)行比較。

血清的使用與儲(chǔ)存:正確的使用及保存血清,才能使血清發(fā)揮應(yīng)有的作用。

1. 儲(chǔ)存條件:血清一般儲(chǔ)存于-20℃,同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融。購買大包裝的血清后,首先要滅活處理,然后分裝成小包裝,儲(chǔ)存于-20℃,使用前融化。融化時(shí)先置于4℃。融化后的血清在4℃不宜長時(shí)間存放,應(yīng)盡快使用。

2. 使用濃度:自從有了合成培養(yǎng)基,血清就是作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5-20%,zui常用是10%。過多血清容易使培養(yǎng)中的細(xì)胞發(fā)生變化,特別是一些二倍體的無限細(xì)胞系,迅速生長之后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。

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標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清FBS SH30370.03 AUSTRALIA 500ML 2800

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關(guān)于10099-141 GIBCO澳洲胎牛血清使用中的常見問題

1.保存血清的辦法?
我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。若你一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。

2.如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
我們建議您將血清從冷凍箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性造成的;而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管中,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜。

4.何謂熱滅活?有必要做熱滅活嗎?
一般以56℃,30分鐘水浴來處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E,可以使補(bǔ)體去活性,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)過處理的血清對(duì)細(xì)胞生長只有微小的促進(jìn),或*沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低。
而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱滅活這一步。如此以來,不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間,更確保您血清的質(zhì)量!

5.如何避免沉淀物的出現(xiàn)?
我們建議您在使用血清的時(shí)候,注意正確的血清解凍步驟,并盡量避免滅活血清及長時(shí)間的將血清置于高溫環(huán)境中。

產(chǎn)品訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨或隔日發(fā)貨(提前準(zhǔn)備干冰)。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日價(jià)格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

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